EMS(甲基磺酸乙酯)怎么用?如何做好安全防护?

EMS?突变?

常用浓度为0.05-0.5摩尔/升,作用时间为5-60分钟。

小心,那东西剧毒致癌。

人工化学诱变技术:

化学诱变技术是指利用某些化学物质来提高生物的自然突变率。这些化学物质被称为“化学诱变剂”。其特点是:可操作性强,简单明了;特异性强,能使位于DNA上的一些碱基发生突变;后代容易稳定遗传,一般在F3代就能稳定;遗传标记的应用是细胞融合技术的基础。

诱变剂主要有五类,它们的特点、作用机理和应用如下:

1,烷化剂:可将某些碱基烷基化,如甲基化鸟苷酸,影响mRNA的转录,从而使蛋白质表达紊乱,使蛋白质重组,改变其性状。临床应用这类物质作为抗癌药,对癌细胞有很强的杀伤作用,所以应用于植物时,也要注意其强大的杀伤作用。

主要有:甲基磺酸乙酯(EMS),是最常用的诱变剂。我们用它作为真菌的遗传标记,突变率很高。常用浓度为0.05-0.5摩尔/升,作用时间为5-60分钟。这种物质有很强的致癌性和挥发性,5%的硫代硫酸钠可作为终止剂和解毒剂。西格玛公司价格:80元/25ml。

硫酸二乙酯(DMS)也是常用的,但由于其毒性较强,目前很少使用,作用机理和用法与EMS基本相同。属于剧毒品,归公安局管。

乙烯亚胺,产量少,很难买到。只要用于大量诱变育种,浓度为0.0001-0.1%,具有高度致癌性!使用时需要缓冲配置。

作为抗癌药的盐酸氮芥,可以从药店买到,但有些地方必须有主任医师的处方。

一般是注射液,稍加稀释即可使用5-10min,甘氨酸可作为终止剂和解毒剂。

环磷酰胺、亚硝基胍等物质也可作为诱变剂,但很少使用。

2.碱基类似物:分子结构与碱基相似,导致DNA复制错配、mRNA转录紊乱、功能蛋白重组和表型改变。这些物质毒性相对较小,但负突变率较高,往往很难得到好的突变体。主要包括:6-溴尿嘧啶、6-BudR、马来酰肼、2-氨基嘌呤等。,也是抗癌药,稍微稀释一下就可以在药店买到。

3.包埋剂:是分子生物学中常用的一种,诱导率高。原理是这类分子的大小可以嵌入碱基分子中,导致错配。最常用的:溴化乙锭(EB),高度致癌!价格贵,但是突变率很高。是实验室常用的试剂,在实际生化店里可以买到,价格1500元/100mg。

4.无机化合物:相对容易获得,效果一般,危险性较小。常用:氯化锂,白色粉末,配成0.1-0.5%溶液30 min-2天。可以去化工商店买:120元/500克。

亚硝酸盐:没有现成的商品。因为这种物质容易分解,所以现在使用。亚硝酸钠和盐酸是常用的制剂。将亚硝酸钠混合至浓度为0.01-0.1mol/L,使用时加入相同浓度和体积的盐酸。

双氧水:又名双氧水,效果不好,所以很少用。

5其他:还原剂盐酸羟胺作用于C,使G-C变成A-T,也是常用的,可以买到。使用浓度:0.1-0.5%,持续60分钟-2小时。更便宜。

生物碱类:如长春碱、秋水仙碱、喜树碱等。

上述诱变剂是致癌物,同时在使用时必须小心。通常用来浸种,最好的方法是在组织培养的培养基中添加诱变剂,诱变率最高。

对人体危害很大,有一定的致癌作用。操作时要严格保护,不要让药物接触皮肤。用过的工具也要严格收集隔离,防止出错。

二、常见化学诱变剂的种类和作用机理

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(1)烷化剂

它是诱导栽培作物突变的最重要的诱变剂。该试剂具有一个或多个活性烷基。烷基取代其他分子的氢原子称为“烷基化”,所以这类物质称为烷化剂。

烷化剂分为以下几类:

1.烷基磺酸盐和烷基硫酸盐

代表性试剂:甲基磺酸乙酯(EMS)和硫酸二乙酯(DES)

2.硝基烷基化合物

代表试剂:亚硝基乙基脲(NEH)、N-亚硝基-N-乙基脲(NEU)。

3.乙二胺和环氧乙烷

代表代理人:乙烯亚胺(EI)

4.芥子气

氮芥和硫芥

烷化剂-烷基化的机制集中在核酸上,导致DNA断裂、缺失或修复

(II)基于核酸类似物

这些化合物具有与DNA碱基相似的结构。

代表代理人:

5-溴尿嘧啶(BU)和5-溴脱氧尿苷(BudR)是胸腺嘧啶(T)的类似物。

2-氨基嘌呤(AP)是腺嘌呤(A)的类似物。

马来酰肼是尿嘧啶的异构体

作用机理:作为DNA的一种成分,渗透到DNA分子中,在DNA复制过程中造成配对错误,从而引起生物体变异。

㈢其他诱变剂

亚硝酸盐可使嘌呤或嘧啶脱氨,改变核酸的结构和性质,引起DNA复制障碍。HNO2 _ 2还能引起DNA双链之间的交联,引起遗传效应。

叠氮化钠(NaN3)为呼吸抑制剂,可引起基因突变,突变频率高,无残留毒性。